紫外可见分光光度法合适的检测波长范围是多少
紫外可见分光光度法合适的检测波长范围是200~800nm。紫外可见光分光光度计工作原理与红外光谱、拉曼光谱的工作原理近似,采用一定频率的紫外可见光照射所需检测的物质,引起物质中电子跃迁,从而表现出随着吸收波长变化而引起的光谱变化,记录光谱变化形成分析数据。紫外可见光分光光度计使用的波长范围为紫外光区200-400nm和可见光区400-850nm。仪器主要结构包括:辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理器、自动记录器、显示器等部件。由光源发出连续辐射光,经单色器形成单色光。单射光照射吸收池,再经光经检测器光电管将光强度转变成电信号,再经显示系统,完成测定。扩展资料紫外分光光度计按照光源种类划分为:传统单光束UV紫外测试,测试过程全程封闭,单光束光源只通过光栅直接照射样品,再经光电倍增管检测器检测。测试空白样品之后才能测试目标样品,全波段需要时间最长为2min;比例双光束UV,测试过程全封闭,单光束光源通过光栅,再经棱镜,分成2束UV,分别照射目标样品与空白样品,再合并光进入光电倍增管检测器检测,经差减法得到结果。目标样品与空白样品可以同时测量,测试灵敏度降低,全波段分析时间长。双光束UV:与比例双光束UV不同之处是通过棱镜分出两道光后,在分别通过光栅,各自分别进入光点倍增管检测器检测。加强了灵敏度,同时保留同时测量空白样品与目标样品的优点,全波段分析时间长。全波段UV:样品与空白样品可以暴露在空气中,照射样品后,进入密闭箱,通过光栅,进入DAD检测器检测。检测样品不需要密闭,外界光线对测试无影响,使用方便准确且空白只需要检测一次,全波段分析时间小于1s。
紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同
1、测量的范围不同: (1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同: (1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同: (1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。(2)可见分光光度计采用低杂散光,高分辨率的单光束单色器,保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰,所以可用紫外分光光度法对这些物质分别进行测定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。当入射光波长一定时,溶液的吸光度A是吸光物质的浓度C及吸收介质厚度l(吸收光程)的函数。首先确定实验条件,并在此条件下测得标准物质的吸收峰以及其对应波长值(同时可获得该物质的最大吸收波长);再在选定的波长范围内(或最大波长值处),分别以(不同浓度)标准溶液的吸光度和溶液浓度为横、纵坐标绘出化合物溶液的标准曲线得到其所对应的数学方程。接着在相同实验条件下配制待测溶液,测得待测溶液的吸光度,最后用已获得的标准曲线方程求出待测溶液中所需测定的化合物的含量。凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。参考资料来源:百度百科-紫外分光光度计百度百科-可见光分光光度计
紫外可见分光光度计的具体使用方法
1、机器开关在机器的右侧,按一下就会打开,有个小的屏幕,可以按数字键来操作选项,测吸光值操作。2、按数字键1,进入选项,有当前参数、吸光度等。3、点击键盘上的GOTO键去设置,一般设置为600,输入直接按数字键就可以。输入之后按ENTER这个键,这个是确认键。4、把样品放到比色皿里面,留一个比色皿方蒸馏水,将蒸馏水的比色皿放到第一个其余的依次放入。5、盖上一起的盖子,拉环的位置正处于测定第一个比色皿的位置,这一步需要归零,按键盘上的ZREO键。6、归零之后,开始依次用力拖动把手,显示屏上就会显示出对应的吸光度,依次纪录数值,就能完成测定吸光值的实验。
紫外可见分光光度计波长范围是什么?
紫外可见分光光度法是在190~800nm波长。紫外可见分光光度计用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。紫外可见分光光度计由5个部件组成:1、辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱,如钨灯、卤钨灯(波长范围350~2500纳米),氘灯或氢灯(180~460纳米),或可调谐染料激光光源等。2、单色器。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件(棱镜或光栅)组成,是用以产生高纯度单色光束的装置,其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。3、试样容器,又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用,分为石英池和玻璃池两种,前者适用于紫外到可见区,后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5~10厘米。4、检测器,又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管,后者较前者更灵敏,特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器,具有快速扫描的特点。5、显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计,常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等,可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
用紫外可见分光光度法测定组分含量时,检测波长如何选择?理由是什么?
选择检测波长是紫外可见分光光度法测定组分含量的一个重要步骤,一般应根据被检测物质的特性和吸收峰的位置来选择。
具体来说,选择检测波长应该考虑以下几个方面:
1. 被检测物质的特性:不同的化合物在紫外可见光谱中的吸收峰位置和强度都不同,因此选择检测波长时应该考虑被检测物质的特性,选择在其吸收峰位置或附近进行检测,以获得更准确的测定结果。
2. 吸收峰的位置:吸收峰的位置是选择检测波长的主要依据。一般来说,选择在吸收峰的最大位置进行检测可以获得最大的检测灵敏度,而选择在吸收峰两侧进行检测则可以获得较高的选择性和特异性。
3. 光程长度:光程长度也会影响选择检测波长。如果光程长度较短,则选择在吸收峰的最大位置进行检测可以获得较高的检测灵敏度;而如果光程长度较长,则选择在吸收峰两侧进行检测可以获得较高的选择性和特异性。
4. 干扰物质:如果样品中存在干扰物质,则需要选择在被检测物质和干扰物质的吸收峰位置之间进行检测,以避免干扰物质对测定结果的影响。
总之,选择检测波长应该综合考虑被检测物质的特性、吸收峰位置、光程长度以及样品中的干扰物质等因素,以获得准确、可靠的测定结果。
紫外分光光度计和可见分光光度计是什么区别?
紫外分光光度计与紫外可见分光光度计的区别在于:
紫外可见分光光度计测量的范围大些,由于各种不同光波发射的灯管不同,紫外和可见光所用就不同。
一般紫外分光光度计量程在200nm->500~600nm间(包括部分可见光);
可见分光光度计在340nm~1000nm;
紫外可见分光光度计就可以调节200nm~1000nm了。
同一种方法用不同的仪器去检测,误差是很大的,几乎能达到5%;而且用同一种仪器在不同空间和时间下测量的数据误差也能达到1%。但是测量后经过各自的空白校正,相信误差不会超过1%,所以用不同的仪器测的数据整理后是可以通用的,但是没有经过空白校正的数据不能互相代替。
PS:用紫外分光时一定要用石英比色皿,不能用玻璃比色皿,因为紫外线很难透过玻璃的。
进口紫外可见分光光度计都是什么品牌?
进口的分光光度计做的比较好的要数美国Quawell的分光光度计了,Quawell系列超微量、高精度紫外分光光度计,利用了液体的表面特性,仅用0.5~2.0ul微量的样品,在检测臂之间形成一个标准的液柱,代替了传统检测中的比色皿。不但节约了样品,也减少了传统检测带来的误差,获得高精确度、高重视性的测定值,是最近几年来的实验室常规仪器里最重要的创新发明之一。
紫外可见分光光度计的用途是什么 紫外可见分光光度计的用途
1、用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。
2、紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。
3、紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。它们的用途又有区别。
4、单光束:适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有很高的稳定性。
5、双光束:自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。仪器复杂,价格较高。
紫外可见分光光度法原理
紫外可见分光光度法原理如下:紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。关于紫外-可见分光光度法的介绍如下:紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。