细胞培养基

细胞培养目的与用途有哪些，细胞培养

细胞培养目的与用途：1、科学研究药物研究开发，如新药筛选，疫苗、基因工程药物、细胞工程药物、研究与开发、单克隆抗体制备等。基础研究，如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。2、生物制药疫苗生产：如病毒性疫苗（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等），多肽疫苗（肿瘤疫苗）等。基因工程药物生产：如EPO等。抗体药物、基因治疗药物生产。细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等。利用细胞法体外测定生物活性物质的活性；并预测其在体内的药效和替代体内法检测其成品的生物活性。扩展资料细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。细胞培养过程复杂、要求严谨，要使细胞在体外长期生存，必须模拟体内环境，供给细胞存活所必需的物质与能量，如水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖、生长因子等，同时要严格控制培养温度、环境、pH等多种因素，细胞才能在体外生存。此外，细胞培养用品的清洗、培养用液的配制、除菌等均有严格要求，特别是无菌操作，是细胞培养成败的关键。细胞系原代细胞首次传代成功后即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。细胞株通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的细胞群。细胞株的这种特定性或标志性必须在整个培养期间始终存在。克隆指由同一个祖先细胞通过有丝分裂所产生的遗传性质相同的细胞群体。

细胞工程培养基的组成成分有哪几类，在离体培养中的功能是什么？

植物组织培养培养基的五类成分（1）无机营养物：主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2—EDTA（螯合剂）的混合。（2）碳源培养的植物组织或细胞：它们的光合作用较弱。因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。（3）维生素：在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。培养基中的维生素属于B族维生素，其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。（4）有机附加物：包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。另外，琼脂也是最常用的有机附加物，它主要是作为培养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。（5）生长调节物质：常用的生长调节物质大致包括以下三类： 1.植物生长素类：如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。 2.细胞分裂素：如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。 3.赤霉素：组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸(GA3)。

培养基有哪些种类？

培养基的种类有：1、按照培养基的成分来分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类；2、按照培养基的物理状态分，可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类；3、按照微生物的种类分，可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类；4、按照培养基用途分，可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。

细胞培养基的类型有哪些？

动物细胞的培养可以使用纯天然的培养基或人工/合成的培养基混合一些天然产物。天然培养基：天然培养基仅由天然生成的生物液体组成。天然培养基非常有用和方便，适用于多种不同的动物细胞培养。但是，由于缺乏对这些天然培养基确切成分的认识，使用天然培养基的主要缺点是可重复性差。人工培养基：通过人为地加入一些营养物质（有机的和无机的）、维生素、盐、O2和CO2气体、血清蛋白、碳水化合物、辅因子，制备成人工或合成的培养基 [1] 。不同的人工培养基被分别设计用于下面的某个用途：1、及时生存（平衡的盐溶液，有特定的pH和渗透压）2、长时间生存（平衡盐溶液辅以各种配方的有机化合物和/或血清）3、不确定生长4、特定功能

培养基的种类

培养基的种类有：1、按照培养基的成分来分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类；2、按照培养基的物理状态分，可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类；3、按照微生物的种类分，可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类；4、按照培养基用途分，可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。

细胞培养基种类及适合于何种细胞

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件：细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10%胎牛血清AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体肿瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清BALB/3T3 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清BHK-21 成纤维细胞 仓鼠 肾 GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAABHL-100 上皮细胞 人 乳房 McCoy'5A, 10% 胎牛血清BT 成纤维细胞 牛 鼻甲骨细胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAACaco-2 上皮细胞 人 结肠腺癌 MEM, 20% 胎牛血清 和NEAAChang 上皮细胞 人 肝脏 BME, 10% 小牛血清CHO-K1 上皮细胞 仓鼠 卵巢 F-12, 10% 胎牛血清Clone 9 上皮细胞 大鼠 肝脏 F-12K, 10% 胎牛血清Clone M-3 上皮细胞 小鼠 黑素瘤 F-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清COS-1 成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% 胎牛血清COS-3 成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% 胎牛血清COS-7 成纤维细胞 猴 肾 DMEM, 10% 胎牛血清CRFK 上皮细胞 猫 肾 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAACV-1 成纤维细胞 猴 肾 MEM, 10% 胎牛血清D-17 上皮细胞 狗 骨肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAADaudi 成淋巴细胞 人 淋巴瘤病人血液 RPMI-1640, 10% 胎牛血清GH1 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 F-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清GH3 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清H9 成淋巴细胞 人 T细胞淋巴瘤 RPMI-1640, 20% 胎牛血清HaK 上皮细胞 仓鼠 肾 BME, 10% 小牛血清HCT-15 上皮细胞 人 结肠直肠腺癌 RPMI-1640, 10% 胎牛血清HeLa 上皮细胞 人 子宫颈癌 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA (in suspension, S-MEM) HEp-2 上皮细胞 人 喉 癌 MEM, 10% 胎牛血清HL-60 成淋巴细胞 人 早幼粒细胞白血病 RPMI-1640, 20% 胎牛血清HT-1080 上皮细胞 人 纤维肉瘤 MEM, 10% HI 胎牛血清 和NEAAHT-29 上皮细胞 人 结肠腺癌 McCoy's 5A, 10% 胎牛血清HUVEC 内皮细胞 人 脐带 F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素盐 100 ug/ mlI-10 上皮细胞 小鼠 睾丸癌 F-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清IM-9 成淋巴细胞 人 骨髓瘤病人骨髓 RPMI-1640, 10% 胎牛血清JEG-2 上皮细胞 人 绒毛膜癌 MEM, 10% 胎牛血清Jensen 成纤维细胞 大鼠 肉瘤 McCoy's 5A, 5% 胎牛血清Jurkat 成淋巴细胞 人 淋巴瘤 RPMI-1640, 10% 胎牛血清K-562 成淋巴细胞 人 骨髓性的白血病 RPMI-1640, 10% 胎牛血清KB 上皮细胞 人 口腔癌 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAAKG-1 骨髓白细胞 人 红白血病病人骨髓 IMDM, 20% 胎牛血清L2 上皮细胞 大鼠 肺 F-12K, 10%胎牛血清L6 大鼠 骨骼肌成肌细胞 DMEM, 10% 胎牛血清LLC-WRC 256 上皮细胞 大鼠 癌 Medium 199, 5% 马血清McCoy 成纤维细胞 小鼠 未知 MEM, 10% 胎牛血清MCF7 上皮细胞 人 乳腺癌 MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰岛素WEHI-3b 类巨噬细胞 小鼠 骨髓单核细胞白血病 DMEM, 10% 胎牛血清WI-38 上皮细胞 人 胚胎肺 BME, 10% 胎牛血清WISH 上皮细胞 人 羊膜 BME, 10% 胎牛血清WS1 人 胚胎皮肤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAAXC 上皮细胞 大鼠 肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAAY-1 上皮细胞 小鼠 肾上腺瘤 F-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清

ms培养基是什么?

　　1，是把其中的微量元素减少到原来的1/2叫1/2MS培养基；　　2，1/3MS培养基就是原来的微量元素减少到1/3；　　例如：通常就是用母液减半，比如要配1L的1/2MS，就先配500mlMS,再加500ml水。　　3，MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 基于此，这种培养基就用他们的名字来命名了。　　4，MS培养液配方单　　mg/L工作液浓度 单位大量元素：　　NH4NO3 1650　　KNO3　1900　　CaCl2·2H2O 440　　MgSO4·7H2O 370　　KH2PO4 170微量元素：　　KI 0.83　　H3BO3 6.2　　MnSO4·4H2O 22.3　　ZnSO4·7H2O 8.6　　Na2MoO4·2H2O 0.25　　CuSO4·5H2O 0.025　　CoCl2·6H2O 0.025铁盐：　　FeSO4·7H2O（27.8）　　Na2-EDTA·2H2O（37.3）　　有机物质：肌醇100　　烟酸0.5　　盐酸吡哆醇（维生素B6） 0.5　　盐酸硫胺素（维生素B1） 0.1　　甘氨酸2.0　　注意：肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液，因为它比较难溶，一般配成100倍，大量元素可以配成1000倍的。　　5，注意事项　　（1）母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。　　（2）母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。　　MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。　　（4）组织培养是否能够获得成功，主要取决于对培养基的选择。不同的培养基具有不同的特点，也就适合于不同的植物种类和接种材料。在开展组织培养项目时，首先要对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择合适的使用。组培用的培养基一般包括基础培养基和激素，但是植物激素的种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料有变化，因此各培养基配方中均不列入植物激素。常用的基础培养基除了有MS培养基，还有B5培养基，N6培养基。　　

关于ms培养基问题？

　　1，是把其中的微量元素减少到原来的1/2叫1/2MS培养基；　　2，1/3MS培养基就是原来的微量元素减少到1/3；　　例如：通常就是用母液减半，比如要配1L的1/2MS，就先配500mlMS,再加500ml水。　　3，MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 基于此，这种培养基就用他们的名字来命名了。　　4，MS培养液配方单　　mg/L工作液浓度 单位大量元素：　　NH4NO3 1650　　KNO3　1900　　CaCl2·2H2O 440　　MgSO4·7H2O 370　　KH2PO4 170微量元素：　　KI 0.83　　H3BO3 6.2　　MnSO4·4H2O 22.3　　ZnSO4·7H2O 8.6　　Na2MoO4·2H2O 0.25　　CuSO4·5H2O 0.025　　CoCl2·6H2O 0.025铁盐：　　FeSO4·7H2O（27.8）　　Na2-EDTA·2H2O（37.3）　　有机物质：肌醇100　　烟酸0.5　　盐酸吡哆醇（维生素B6） 0.5　　盐酸硫胺素（维生素B1） 0.1　　甘氨酸2.0　　注意：肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液，因为它比较难溶，一般配成100倍，大量元素可以配成1000倍的。　　5，注意事项　　（1）母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。　　（2）母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。　　MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。　　（4）组织培养是否能够获得成功，主要取决于对培养基的选择。不同的培养基具有不同的特点，也就适合于不同的植物种类和接种材料。在开展组织培养项目时，首先要对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择合适的使用。组培用的培养基一般包括基础培养基和激素，但是植物激素的种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料有变化，因此各培养基配方中均不列入植物激素。常用的基础培养基除了有MS培养基，还有B5培养基，N6培养基。　　

细胞培养注意事项 细胞培养注意事项有什么

1、无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内，解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。

2、常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性，可与细胞长期共存，对细胞有潜在影响，但体积小，不易鉴别，可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快，在短时间内即可大量扩增，并产生毒素杀死细胞。真菌的种类繁多，肉眼可见，漂浮于培养液面上，可呈丝状、管状或树枝状等。

3、一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力，在低温下，细胞的代谢活力及核分裂能力降低。若温度不低于0℃，虽然细胞代谢受到影响，但无损伤作用；25～35℃时，细胞以缓慢的速度生长；但若被置于40℃数小时，则不仅不利于细胞生存、生长，甚至可导致其死亡。

4、高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此，渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力，实际应用中，260～320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。

5、细胞的体外培养需要理想的气体环境，氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞生存、代谢与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。

细胞培养过程需要注意哪些事项？

1、要保证实验材料新鲜，从活体分离材料后要注意低温保存。2、要保证无菌操作。可以在操作时用的培养液中加入平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、要注意酶液的浓度和控制消化时间。4、要注意培养液的选择。不同的细胞有对培养液中营养的要求不同，根据所分离细胞的特性选择。无菌操作、控制消化时间、及时关注细胞生长状态。

细胞培养基有哪几种？

细胞培养的各种各样的人工培养基可以分为以下四种类型：含血清的培养基：胎牛血清是动物细胞培养基最常见的补充成分。它用来作为一种成本相对较低的补充成分，提供动物细胞培养最佳的培养基。这些补充剂能够为不稳定或不溶于水的营养物质提供载体或螯合剂，提供激素和生长因子，蛋白酶抑制剂，并结合并中和有毒部分。无血清培养基：培养基中含有血清存在有很多缺点，可能会成为免疫学研究中潜在的严重误解的原因。为了克服使用血清的这些缺点，一些无血清培养基中已经开发出来了。这些培养基通常是专门配制的，用以单一类型细胞的培养，包含确定量的纯化的生长因子、脂蛋白和其它蛋白质，而这些物质本来是由血清提供的。这些培养基也被称为“确定的培养基”，因为这些培养基中的物质是精确可知的。确定化学成分的培养基：这些培养基包含无污染的超纯无机和有机成分，也可能含有纯蛋白质添加剂，如生长因子。这些成分通过基因工程细菌或酵母生产，添加维生素、胆固醇、特定氨基酸和脂肪酸。无蛋白质培养基：无蛋白质培养基含有任何蛋白质，仅包含用于细胞培养所必需的非蛋白成分。相比血清培养基，无蛋白培养基促进较好的细胞生长和蛋白表达，并有利于下游的表达产物纯化。MEM，RPMI-1640等配方不含蛋白质，需要时可补充蛋白质。 不同类型的天然和人工培养基在表一中介绍。

培养基的主要成分是什么?

培养基的主要成分有氮源、碳源、无机盐、水分及一些生长因子，它们主要为细菌的生长繁殖提供营养和生长环境。水：水是良好的溶剂，细菌所需要的营养物质必须先溶于水，营养的吸收与代谢均需有水才能进行。制备培养基常用不含杂质的蒸馏水或离子交换水。氮源：氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸、蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。碳源：碳源是组成培养基的主要成分之一。常用的碳源有糖类、油脂、有机酸和低碳醇。在特殊情况下（如碳源贫乏时），蛋白质水解产物或氨基酸等也可被某些菌种作为碳源使用。无机盐：无机盐是细胞维持生命活动所不可缺少的营养成分，主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl－、PO43-、SO42-、HCO3－等，主要作用为维持细胞培养液渗透压平衡，参与细胞的代谢活动。此外，通过提供钠，K+和Ca2+，帮助细胞调节细胞膜功能。注意事项：培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。以上内容参考：百度百科-培养基

培养基的主要成分是什么?

培养基的成分是营养物质、水、凝固物质、抑制剂、指示剂。营养物质，营养物质提供细菌生长繁殖所需的能量、合成菌体的原料以及激活细菌酶的活性和调节渗透压等作用，细菌需要的营养物质主要有氮源、碳源、无机盐及生长因子，例如，蛋白胨、肉浸液、血液、生长因子。培养基的主要成分特点水是良好的溶剂，细菌所需要的营养物质必须先溶于水，营养的吸收与代谢均需有水才能进行，制备培养基常用不含杂质的蒸馏水或离子交换水，凝固物质，即赋形剂，制备固体培养基时，必须加入凝固物质，如琼脂、明胶、卵白蛋白及血清等。理想的凝固物质应具有以下特性，本身不被细菌利用，在微生物生长温度范围内保持固体状态，凝固点的温度对微生物无害，不因消毒灭菌而破坏，透明度好，黏着力强，目前认为最合适的凝固物质是琼脂。