细胞培养的方法有哪些?求详解
细胞培养首先分为原代培养和传代培养.
原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞,然后继续进行传代、冻存；
传代培养首先：
细胞复苏:
1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.
2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养瓶内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养,24h后换液；也可复苏当时离心（1000rpm 5min左右）后,完全培养基重悬培养,适时换液.
细胞传代:
1.贴壁细胞:
对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.PBS清洗2-3次,去除血清和死细胞,50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后收集离心（1000rpm 5min左右）,新鲜培养基重悬沉淀,加入完全培养基后继续培养或实验.
2.悬浮细胞:
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度或需更换新培养基,可先离心（1000rpm,5min左右）后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养.
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细胞培养目的与用途有哪些，细胞培养
细胞培养目的与用途：1、科学研究药物研究开发，如新药筛选，疫苗、基因工程药物、细胞工程药物、研究与开发、单克隆抗体制备等。基础研究，如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。2、生物制药疫苗生产：如病毒性疫苗（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等），多肽疫苗（肿瘤疫苗）等。基因工程药物生产：如EPO等。抗体药物、基因治疗药物生产。细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等。利用细胞法体外测定生物活性物质的活性；并预测其在体内的药效和替代体内法检测其成品的生物活性。扩展资料细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。细胞培养过程复杂、要求严谨，要使细胞在体外长期生存，必须模拟体内环境，供给细胞存活所必需的物质与能量，如水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖、生长因子等，同时要严格控制培养温度、环境、pH等多种因素，细胞才能在体外生存。此外，细胞培养用品的清洗、培养用液的配制、除菌等均有严格要求，特别是无菌操作，是细胞培养成败的关键。细胞系原代细胞首次传代成功后即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。细胞株通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的细胞群。细胞株的这种特定性或标志性必须在整个培养期间始终存在。克隆指由同一个祖先细胞通过有丝分裂所产生的遗传性质相同的细胞群体。
细胞培养获得成功的关键要素是什么?
1.要保证无菌，包括无菌操作，无菌环境。枪头等要及时灭菌，培养瓶，移液管最好使用一次性的，如果你的细胞比较不好养，最好使用一次性的。
2.要传代的时候细胞传代的数量不能太少，否则细胞不容易养活。另外，传代不要过度频繁，即使是肿瘤细胞。
3.不要经常用胰酶消化细胞，且消化时间不要过长。
4.根据细胞生长情况，即使更换新鲜培养基。
5.血清一般要冻存在-20摄氏度，用的时候在4摄氏度融化，不要反复冻存，最好用10ml的离心管分装使用。
细胞培养目的与用途有哪些，细胞培养，什么是细胞培
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细胞培养目的与用途：
1．科学研究
（1）药物研究开发，如新药筛选，疫苗、基因工程药物、细胞工程药物
研究与开发、单克隆抗体制备等。
（2）基础研究，如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。
2．生物制药
（1）疫苗生产：如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)，多肽疫
苗（肿瘤疫苗)等。
（2）基因工程药物生产：如EPO等。
（3）抗体药物、基因治疗药物生产。
（4）细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等。
（5）利用细胞法体外测定生物活性物质的活性；并预测其在体内的药效和替代体内法检测其成品的生物活性。
