动物细胞的大规模培养方法中说法错误的是
动物细胞的大规模培养方法中说法错误的是：细胞遗传物质稳定，不会发生变异现象。题目：动物细胞培养中说法错误的是（）。A．正常细胞体外条件下不能无限传代。B．细胞在培养瓶中进行有丝分裂，一般不分化。C．细胞遗传物质稳定，不会发生变异现象。D．细胞常用于分泌性蛋白的生产。答案：C。解析：试题分析：正常细胞体外条件下不能无限传代，只有癌细胞具有无限传代的能力，故A正确；细胞在培养瓶中通过有丝分裂增殖，一般不会发生细胞分化，故B正确。原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40~50代，细胞在传至10—50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化，再继续传代培养时，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，故C错。细胞培养技术有很多用途，如生产分泌性蛋白药物、有毒物质的检测等，故D正确。考点：本题考查动物细胞培养的相关知识。点评：本题意在考查考生的识记能力和理解判断能力，属于容易题。动物细胞的大规模培养方法：根据动物细胞的类型，可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。
动物细胞培养的条件
动物细胞培养的条件如下：1、无菌、无毒的环境对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。2、营养物质无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）。血清和血浆（提供细胞生长必须的营养成份）3、温度和气体环境温度和pH（36.5±0.5℃，7.2至7.4）；气体环境（95%的空气+5%CO₂的混合气体）其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定。4、培养液成分体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。动物细胞培养分类：1、原代细胞将动物各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，在合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。培养的细胞为正常的动物细胞，一般培养10代后不再增殖，死亡。2、传代细胞传代培养是细胞培养常规保种方法之一，也是所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长，这一过程就叫传代。传代培养可获得大量供实验所需细胞。细胞传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细地无菌操作。培养的细胞为癌变或人为癌化的细胞，理论上可以无限增殖。癌化的方式有很多：进行癌基因突变，感染病毒，从癌症供体体内分离，物理或化学方法（如紫外，化学试剂）等。
动物细胞培养需要哪些条件
微生物、动物、植物细胞培养的异同点如下：◆不同点：首先在培养基上，微生物是固体、半固体培养基都有，成分主要是水、无机盐、生长因子、碳源、氮源等。如果是病毒的话要用细菌进行培养；动物的话用天然培养基加生长因子比较好，一般是液体培养基，成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；而植物培养基用合成培养基就可以了，一般是固体培养基，成分主要是矿质元素、蔗糖、纤维素、植物激素、有机添加剂。其次是各自培养的原理上的不同，微生物细胞培养的原理是微生物细胞的增殖，动物细胞培养的原理是细胞的增殖，植物细胞培养原理是细胞的全能性。最后，微生物细胞培养主要是获得其代谢产物或次级代谢产物或得到细胞本身；植物细胞培养是获得新个体或细胞产品，应用与快速繁殖试管苗、细胞产品、人工种子、转基因植物的培育等。动物细胞培养是获得大量新生细胞或细胞产品，应用是获得细胞的产物或细胞等。另外，动物细胞分散用到的是胰蛋白酶，植物是纤维素酶等。◆ 相同点：两者都需要培养基、都需要无菌操作，防止染菌、培养时候都需要适当的温度等条件。◆ 综上所述见下表：微生物 动物细胞 植物细胞大小（um） 1~10 10~100 10~100悬浮生长 可以 多数细胞需附着表面才能生长 可以，但易结团，无单个细胞营养要求 简单 非常复杂 较复杂生长速率 快，倍增时间为0.5~5小时 慢，倍增时间为15~100小时 慢，倍增时间为24~74小时代谢调节 内部 内部，激素 内部，激素环境敏感 不敏感 非常敏感 能忍受广泛范围细胞分化 无 有 高剪切力敏感 低 非常高 高传统变异，筛选技术 广泛使用 不常使用 有时使用细胞或产物浓度 较高 低 低由于它们所用的培养基不同，培养是所要求的条件不同所以在批量生产我们所需的目的产物时就要选择相应的生物反应器。在选择生物反应器时要注意到生物反应器在生物反应过程的剪切力、传质问题如气-液质量传递和液-固质量传递。生物反应器是利用生物催化剂为细胞培养（或发酵）或酶反应提供良好的反应环境的设备，通常称为发酵罐或酶反应器。用于污水生物处理的曝气池或厌气消化罐也可作为生物反应器的一类。生物反应器是生物反应过程中的关键设备，它的结构、操作方式和操作条件对生物技术产品的质量、转化率和能耗有着密切关系。现在就三种生物反应器进行说明。（一）微生物细胞培养生物反应器的选择生物处理的主体是具有特定功能的各种微生物，由于氧化分解恶臭，微生物细胞一方面获得了生物所需的能量，另一方面获得细胞增殖所需的细胞物质，从而维持了细胞的正常生命活动。微生物有其自身的新陈代谢，代谢活动都是在酶的作用下进行的，只有创造适宜的生存条件，使酶的机能得以充分发挥，微生物才能正常生长，才能利用恶臭物质作为生长所需的能源、碳源和氮源等，因此微生物细胞培养生物反应器的选择首先要确保微生物生长的基本条件。根据微生物的培养特点，一般选择生物反应器为膜生物反应器和光合微生物生物反应器等。（二）动物细胞培养生物反应器的选择动物细胞与微生物细胞有很大的差异，对体外培养有严格的要求，如动物细胞对剪切非常敏感，反应器的选择不能有像微生物细胞那样高的剪切力，因此，传统的微生物细胞生物反应器应该经过改造才能适用动物生物反应器。动物细胞培养分为三种类型，一类是悬浮培养，指细胞在培养器中自有悬浮生长的过程，要勇于非贴壁依赖性细胞，此类细胞体外生长不需贴壁，可以采用微生物的方法在培养基中悬浮培养。此类细胞培养可以选择的相应反应器为：搅拌反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器、气升式反应器；另一类是贴壁培养，指必须贴附在固体介质表面上生长的细胞培养，主要适用于贴壁依赖型细胞（亦称贴壁型细胞），大多数动物细胞都属于这一类型。这类细胞生长需要附着于某些带适量正电荷的固体和半固体表面，细胞贴附生长后，不再是原有的形态，一般呈单一化，主要有成纤维细胞型、上皮型、游走型和多形型等。此类细胞培养可以选择的生物反应器为：搅拌反应器（微载体培养）、玻璃珠床反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器等；再有一类是固定化培养，这类培养既适用于贴壁依赖性细胞，又适用于非贴壁依赖性细胞的包埋培养方式，具有细胞生长密度高、抗剪切力和抗污染能力强的优点。这一类细胞培养的生物反应器选择为：流化床反应器、固化床反应器等。（三）植物细胞培养生物反应器的选择植物细胞培养生物反应器最初大多数采用微生物反应器。由于植物细胞与微生物细胞形态结构不同，植物细胞较微生物细胞大，对氧需求小，对剪切力却很敏感，因此不能像微生物培养那样采用高剪切的搅拌，因而，混合显得更重要。目前，由于植物细胞悬浮技术的发展，单细胞培养的成功加上各种新型生物反应器的问世，使得植物细胞有可能像微生物那样在发酵罐中大规模连续培养。用于植物细胞培养的反应器主要有搅拌式、非搅拌式及其他新型生物反应器，另外还有植物细胞固定化反应器和膜生物反应器等。总之，在选择相应的生物反应器之前要了解该种细胞培养的特点及其注意事项来选择相应的反应器。
