如何构建载体
1 启动子的选用和改造外源基因表达量不足往往是得不到理想的转基因植物的重要原因。由于启动子在决定基因表达方面起关键作用，因此，选择合适的植物启动子和改进其活性是增强外源基因表达首先要考虑的问题。目前在植物表达载体中广泛应用的启动子是组成型启动子，例如，绝大多数双子叶转基因植物均使用 C a M V 3 5 S 启动子，单子叶转基因植物主要使用来自玉米的 U b i q u i t i n 启动子和来自水稻的 A c t i n l 启动子。在这些组成型表达启动子的控制下，外源基因在转基因植物的所有部位和所有的发育阶段都会表达。然而，外源基因在受体植物内持续、高效的表达不但造成浪费，往往还会引起植物的形态发生改变，影响植物的生长发育。为了使外源基因在植物体内有效发挥作用，同时又可减少对植物的不利影响，目前人们对特异表达启动子的研究和应用越来越重视。已发现的特异性启动子主要包括器官特异性启动子和诱导特异性启动子。例如，种子特异性启动子、果实特异性启动子、叶肉细胞特异性启动子、根特异性启动子、损伤诱导特异性启动子、化学诱导特异性启动子、光诱导特异性启动子、热激诱导特异性启动子等。这些特异性启动子的克隆和应用为在植物中特异性地表达外源基因奠定了基础。例如，瑞士 C I B A - G E I G Y 公司使用 P R - I A 启动子控制转基因烟草中 B t 毒蛋白基因的表达，由于该启动子可受水杨酸及其衍生物诱导，通过喷酒廉价、无公害的化学物质，诱导抗虫基因在虫害重发生季节表达，显然是一个十分有效的途径。在植物转基因研究中，使用天然的启动子往往不能取得令人满意的结果，尤其是在进行特异表达和诱导表达时，表达水平大多不够理想。对现有启动子进行改造，构建复合式启动子将是十分重要的途径。例如， N i 等人将章鱼碱合成酶基因启动子的转录激活区与甘露碱合成酶基因启动子构成了复合启动子， G U S 表达结果表示：改造后的启动子活性比 3 5 S 启动子明显提高。吴瑞等人将操作诱导型的 P I - I I 基因启动子与水稻 A c t i n l 基因内含子 1 进行组合，新型启动子的表达活性提高了近 1 0 倍（专利）。在植物基因工程研究中，这些人工组建的启动子发挥了重要作用。 2 增强翻译效率为了增强外源基因的翻译效率，构建载体时一般要对基因进行修饰，主要考虑三方面内容： 2 . 1 添加 5 ｀ - 3 ｀ - 非翻译序列许多实验已经发现，真核基因的 5 ｀ - 3 ｀ - 非翻译序列（ U T R ）对基因的正常表达是非常必要的，该区段的缺失常会导致 m R N A 的稳定性和翻译水平显著下降。例如，在烟草花叶病毒（ T M V ）的 1 2 6 k D a 蛋白基因翻译起始位点上游，有一个由 6 8 b p 核苷酸组成的Ω元件，这一元件为核糖体提供了新的结合位点，能使 G u s 基因的翻译活性提高数十倍。目前已有许多载体中外源基因的 5 ｀ - 端添加了Ω翻译增强序列。 I n g e l b r e c h t 等曾对多种基因的 3 ｀ - 端序列进行过研究，发现章鱼碱合成酶基因的 3 ｀ - 端序列能使 N P T I I 基因的瞬间表达提高 2 0 倍以上。另外，不同基因的 3 ｀ - 端序列增进基因表达的效率有所不同，例如， r b c S 3 ｀ - 端序列对基因表达的促进作用比查尔酮合酶基因的 3 ｀ - 端序列高 6 0 倍。 2 . 2 优化起始密码周边序列虽然起始密码子在生物界是通用的，然而，从不同生物来源的基因各有其特殊的起始密码周边序列。例如，植物起始密码子周边序列的典型特征是 A A C C A U G C , 动物起始密码子周边序列为 C A C C A U G ，原核生物的则与二者差别较大。 K o z a k 详细研究过起始密码子 A T G 周边碱基定点突变后对转录和翻译所造成的影响，并总结出在真核生物中，起始密码子周边序列为 A C C A T G G 时转录和翻译效率最高，特别是 - 3 位的 A 对翻译效率非常重要。该序列被后人称为 K o z a k 序列，并被应用于表达载体的构建中。例如，有一个细菌的几丁质酶基因，原来的起始密码周边序列为 U U U A U G G ，当被修饰为 A C C A U G G ，其在烟草中的表达水平提高了 8 倍。因此，利用非植物来源的基因构建表达载体时，应根据植物起始密码子周边序列的特征加以修饰改造。 2 . 3 对基因编码区加以改造 如果外源基因是来自于原核生物，由于表达机制的差异，这些基因在植物体内往往表达水平很低，例如，来自于苏云金芽孢杆菌的野生型杀虫蛋白基因在植物中的表达量非常低，研究发现这是由于原核基因与植物基因的差异造成了 m R N A 稳定性下降。美国 M o n s a n t o 公司 P e r l a k 等人在不改变毒蛋白氨基酸序列的前提下，对杀虫蛋白基因进行了改造，选用植物偏爱的密码子，增加了 G C 含量，去除原序列下影响 m R N A 稳定的元件，结果在转基因植株中毒蛋白的表达量增加了 3 0 ～ 1 0 0 倍，获得了明显的抗虫效果。 3 消除位置效应当外源基因被移人受体植物中之后，它在不同的转基因植株中的表达水平往往有很大差异。这主要是由于外源基因在受体植物的基因组内插入位点不同造成的。这就是所谓的 " 位置效应 " 。为了消除位置效应，使外源基因都能够整合在植物基因组的转录活跃区，在目前的表达载体构建策略中通常会考虑到核基质结合区以及定点整合技术的应用。核基质结合区（ m a t r i x a s s o c i a t i o n r e g i o n , M A R ）是存在于真核细胞染色质中的一段与核基质特异结合的 D N A 序列。一般认为， M A R 序列位于转录活跃的 D N A 环状结构哉的边界，其功能是造成一种分割作用，使每个转录单元保持相对的独立性，免受周围染色质的影响。有关研究表明，将 M A R 置于目的基因的两侧，构建成包含 M A R - g e n e - M A R 结构的植物表达载体，用于遗传转化，能明显提高目的基因的表达水平，降低不同转基因植株之间目的基因表达水平的差异，减少位置效应。例如， A l l e n 等人研究了异源 M A R （来自酵母）和同源 M A R （来自烟草）对 G u s 基因在烟草中表达的影响，发现酵母的 M A R 能使转基因表达水平平均提高 1 2 倍，而烟草本身的 M A R 能使转基因的表达水平平均提高 6 0 倍。使用来源于鸡溶菌酶基因的 M A R 也可起到同样作用。另一可行的途径是采用定点整合技术，这一技术的主要原理是，当转化载体含有与寄主染色体同源的 D N A 片段时，外源基因可以通过同源重组定点整合于染色体的特定部位。实际操作时首先要分离染色体转录活性区域的 D N A 片段，然后构建植物表达载体。在微生物的遗传操作中，同源重组定点整合已成为一项常规技术，在动物中外源基因的定点整合已获得成功，而在植物中除了叶绿体表达载体可实现定点整合以外，细胞核转化中还很少有成功的报道。 4 构建叶绿体表达载体为了克服细胞核转化中经常出现的外源基因表达效率低，位置效应及由于核基因随花粉扩散而带来的不安全性等问题，近几年出现的一种新兴的遗传转化技术 - - 叶绿体转化，正以它的优越性和发展前景日益为人们所认识并受到重视。到目前为止，已在烟草、水稻、拟南芥、马铃薯和油菜（侯丙凯等，等发表） 5 种植物中相继实现了叶绿体转化，使得这一转化技术开始成为植物基因工程中新的生长点。由于目前多种植物的叶绿体基因组全序列已被测定，这就为外源基因通过同源重组机制定点整合进叶绿体基因组奠定了基础，目前构建的叶绿体表达载体基本上都属于定点整合载体。构建叶绿体表达载体基本上都属于定点事例载体。构建叶绿体表达载体时，一般都在外源基因表达盒的两侧各连接一段叶绿体的 D N A 序列，称为同源重组片段或定位片段（ T a r g e t i n g f r a g m e n t ）。当载体被导入叶绿体后，通过这两个片段与叶绿体基因组上的相同片段发生同源重组，就可能将外源基因整合到叶绿体基因组的特定位点。在以作物改良为目的的叶绿体转化中，要求同源重组发生以后，外源基因的插入既不引起叶绿体基因原有序列丢失，又不致于破坏插入点处原有基因的功能。为满足这一要求，已有的工作都选用了相邻的两个基因作为同源重组片段，例如 r b c L / a c c D ， 1 6 S t r n V / r p s l 2 r p s 7 , p s b A / t r n K , r p s 7 / n d h B 。当同源重组发生以后，外源基因定点插入在两个相邻基因的间隔区，保证了原有基因的功能不受影响。最近， D a n i e l 等利用烟草叶绿体基因 t r n A 和 t r n I 作为同源重组片段，构建了一种通用载体（ u n i v e r s a l v e c t o r ）。由于 t r n A 和 t r n I 的 D N A 序列在高等植物中是高度保守的，作者认为这种载体可用于多种不同植物的叶绿体转化。如果这种载体的通用性得到证实，那么这项工作无疑为构建方便而实用的新型叶绿体表达载体提供了一个好的思路。 由于叶绿体基因组的高拷贝性，定点整合进叶绿体基因组的外源基因往往会得到高效率表达，例如 M c B r i d e 等人首次将 B t C r y I A ( c ) 毒素基因转入烟草叶绿体， B t 毒素蛋白的表达量高达叶子总蛋白的 3 % ～ 5 % ，而通常的核转化技术只能达到 0 . 0 0 1 % ～ 0 . 6 % 。最近， K o t a 等将 B t C r y 2 A a 2 蛋白 基因转入烟草转入烟草叶绿体，也发现毒蛋白在烟草叶子中的表达量很高，占可溶性蛋白的 2 % ～ 3 % ，比细胞核转化高出 2 0 ～ 3 0 倍，转基因烟草不仅能抗敏感昆虫，而且能够百分之百地杀死那些产生了高抗性的昆虫。 S t a u b 等最近报道，将人的生长激素基因转入烟草叶绿体，其表达量竟高达叶片总蛋白的 7 % ，比细胞核转化高出 3 0 0 倍。这些实验充分说明，叶绿体表达载体的构建和转化，是实现外源基因高效表达的重要途径之一。 5 定位信号的应用上述几种载体优化策略主要目的是提高外源基因的转录和翻译效率，然而，高水平表达的外源蛋白能否在植物细胞内稳定存在以及积累量的多少是植物遗传转化中需要考虑的另一重要问题。近几年的研究发现，如果某些外源基因连接上适当的定位信号序列，使外源蛋白产生后定向运输到细胞内的特定部位，例如：叶绿体、内质网、液泡等，则可明显提高外源蛋白的稳定性和累积量。这是因为内质网等特定区域为某些外源蛋白提供了一个相对稳定的内环境，有效防止了外源蛋白的降解。例如， W o n g 等将拟南芥 r b c S 亚基的转运肽序列连接于杀虫蛋白基因之前，发现杀虫蛋白能够特异性地积累在转基因烟草的叶绿体内，外源蛋白总的积累量比对照提高了 1 0 ～ 2 0 倍。最近，叶梁、宋艳茹等也将 r b c S 亚基的转运肽序列连接于 P H B 合成相关基因之前，试图使基因表达产物在转基因油菜种子的质体中积累，从而提高外源蛋白含量。另外， W a n d e l t 等和 S c h o u t e n 等将内质网定位序列（四肽 K D E L 的编码序列）与外源蛋白基因相连接，发现外源蛋白在转基因植物中的含量有了显著提高。显然，定位信号对于促进蛋白质积累有积极作用，但同一种定位信号是否适用于所有的蛋白还有待于进一步确定。 6 内含子在增强基因表达方面的应用内含子增强基因表达的作用最初是由 C a l l i s 等在转基因玉米中发现的，玉米乙醇脱氢酶基因（ A d h l ）的第一个内含子（ i n t r o n 1 ）对外源基因表达有明显增强作用，该基因的其他内含子（例如 i n t r o n 8 , i n t r o n 9 ）也有一定的增强作用。后来， V a s i l 等也发现玉米的果糖合成酶基因的第一个内含子能使 C A T 表达水平提高 1 0 倍。水稻肌动蛋白基因的第三个内含子也能使报道基因的表达水平提高 2 ～ 6 倍。至今对内含子增强基因表达的机制不不清楚，但一般认为可能是内含子的存在增强了 m R N A 的加工效率和 m R N A 稳定性。 T a n a k a 等人的多项研究表明，内含子对基因表达的增强作用主要发生在单子叶植物，在双子叶植物中不明显。由于内含子对基因表达有增强作用， M c e l r o y 等在构建单子叶植物表达载体时，特意将水稻的肌动蛋白基因的第一个内含子保留在该基因启动子的下游。同样， C h r i s t e n s e n 等在构建载体时将玉米 U b i q u i t i n 基因的第一个内含子置于启动子下游，以增强外源基因在单子叶植物中的表达。然而，有研究指出，特定内含子对基因表达的促进作用取决于启动子强度、细胞类型、目的基因序列等多种因素，甚至有时会取决于内含子在载体上的位置。例如，玉米 A d h l 基因的内含子 9 置于 G u s 基因的 5 ｀端，在 C a M V 3 5 S 启动子调控下， G u s 基因的表达未见增强；当把内含子置于 G u s 基因 3 端，在同样的启动子控制下， G u s 基因的表达水平却增加了大约 3 倍。由此可见，内含子对基因表达的作用机制可能是很复杂的，如何利用内含子构建高效植物表达载体，目前还缺乏一个固定的模式，值得进一步探讨。 7 多基因策略迄今为止，多数的遗传转化研究都是将单一的外源基因转入受体植物。但有时由于单基因表达强度不够或作用机制单一，尚不能获得理想的转基因植物。如果把两个或两个以上的能起协同作用的基因同时转入植物，将会获得比单基因转化更为理想的结果。这一策略在培育抗病、抗虫等抗逆性转基因植物方面已得到应用。例如，根据抗虫基因的抗虫谱及作用机制的不同，可选择两个功能互补的基因进行载体构建，并通过一定方式将两个抗虫基因同时转入一个植物中去。王伟 等将外源凝集素基因和蛋白酶抑制剂基因同时转入棉花，得到了含双价抗虫基因的转化植株。 B a r t o n 等将 B t 杀虫蛋白基因和蝎毒素基因同时转入烟草，其抗虫性和防止害虫产生抗性的能力大为提高（专利）。在抗病方面，本实验室蓝海燕等构建了包含β - 1 ， 3 - 葡聚糖酶基因及几丁质酶基因的双价植物表达载体，并将其导入油菜和棉花，结果表明，转基因植株均产生了明显的抗病性。最近，冯道荣、李宝健等将 2 ～ 3 个抗真菌病基因和 h p t 基因连在一个载体上，两个抗虫基因与 b a r 基因连在另一个载体上，用基因枪将它们共同导入水稻植株中，结果表明， 7 0 % 的 R 。代植株含有导入的全部外源基因（ 6 ～ 7 个），且导入的多个外源基因趋向于整合在基因组的一个或两个位点。一般常规的转化，尚不能将大于 2 5 k b 的外源 D N A 片段导入植物细胞。而一些功能相关的基因，比如植物中的数量性状基因、抗病基因等，大多成 " 基因簇 " 的形式存在。如果将某些大于 1 0 0 k b 的大片段 D N A ，如植物染色体中自然存在的基因簇或并不相连锁的一系列外源基因导入植物基因组的同一位点，那么将有可能出现由多基因控制的优良性状或产生广谱的抗虫性、抗病性等，还可以赋予受体细胞一种全新的代谢途径，产生新的生物分子。不仅如此，大片段基因群或基因簇的同步插入还可以在一定程度上克服转基因带来的位置效应，减少基因沉默等不良现象的发生。最近，美国的 H a m i l t o n 和中国的刘耀光分别开发出了新一代载体系统，即具有克隆大片段 D N A 和借助于农杆菌介导直接将其转化植物的 B I B A C 和 T A C 。这两种载体不仅可以加速基因的图位克隆，而且对于实现多基因控制的品种改良也会有潜在的应用价值。目前，关于 B I B A C 和 T A C 载体在多基因转化方面的应用研究还刚刚开始。 8 筛选标记基因的利用和删除筛选标记基因是指在遗传转化中能够使转化细胞（或个体）从众多的非转化细胞中筛选出来的标记基因。它们通常可以使转基因细胞产生对某种选择剂具有抗性的产物，从而使转基因细胞在添加这种选择的培养基上正常生长，而非转基因细胞由于缺乏抗性则表现出对此选择剂的敏感性，不能生长、发育和分化。在构建载体时，筛选标记基因连接在目的基因一旁，两者各有自己的基因调控序列（如启动子、终止子等）。目前常用的筛选标记基因主要有两大类：抗生素抗性酶基因和除草剂抗性酶基因。前者可产生对某种抗生素的抗性，后者可产生对除草剂的抗性。使用最多的抗生素抗性酶基因包括 N P T I I 基因（产生新霉素磷酸转移酶，抗卡那霉素）、 H P T 基因（产生潮霉素磷酸转移酶，抗潮霉素）和 G e n t 基因（抗庆大霉素）等。常用的抗除草剂基因包括 E P S P 基因（产生 5 - 烯醇式丙酮酸莽草酸 - 3 - 磷酸合酶，抗草甘磷）、 G O X 基因（产生草甘膦氧化酶、降解草甘膦）、 b a r 基因（产生 P P T 乙酰转移酶，抗 B i a l a p h o s 或 g l u f o s i n a t e ）等。上面这些当中 1 、 2 、 3 、 5 、 6 都是值得注意的，特别是 5 ，因为你要向细胞外分泌。骨架载体可以选择 P B I 1 2 1 ，然后你可以在上面改动基因型。后面的就是克隆的步骤了，相对简单。 1 首先获得目的基因加酶切位点，连入改好的载体中。 2 将质粒转入大肠杆菌 D H 5 a 扩增 3 将扩增好的质粒转入植物细胞内进行表达 4 收集根细胞外培养基检测是否有该蛋白的表达和分泌。至于改造载体那几个步骤要是答题的话简单说说就可以了，毕竟如果真的做出一个好载体都可以自己开公司了。 简单给你说一下步骤： 1 选择合适酶切位点，主要参考你所用的载体的多克隆位点，一般建议用双酶切，这样就不存在方向验证的问题； 2 根据你所选用的酶切位点设计引物克隆基因； 3 分别酶切载体和基因的 P C R 产物 ，然后回收。可以选择切胶回收，也可以用无水乙醇沉淀； 4 连接酶链接 5 转化 6 提质粒验证。要进行 P C R 验证和酶切验证。 7 测序
以什么为载体
问题一：以什么契机，以什么为载体，以什么为依托 依托，，，经济上的繁荣和稳定是根本
军事上提升对敌核打击能力和导弹多波对敌进攻能力，针对美日的围堵和不良倾向预案和演练对敌打击
媒体上正视我们的海疆问题和日美的动向，增强民众爱国意识
契机，，，把握海疆问题敌人的动向、事件、敌国 *** 言论军事动向展开针对性的媒体宣传和应对性军事动作顺势
作为，这是有步骤收复海疆的比较合理的方法，符合和平发展的主题，在常态海监巡航下这种机会会很
多，我认为近两年要以此为重点展开这个工作，时间点上最佳，这种方法比大动作稳妥有效
导向，，，，就是外交媒体经济发展方面的对敌国的导向，就是让敌国在海疆问题上做出一个正确的选择，尊重
历史顺应国际和平发展的大趋势而不要走向战争极端，既给敌对国展示中国在海疆问题上不惜一战
的决心，也给敌对国开放和平发展的大门，犯我者必打，不侵犯我国海疆就和平相处
问题二：以什么为重点为抓手为手段为载体 具体实施方式
问题三：散文以什么为载体 文章
散文的基本特点是形散意不散……直观的感受就是语言优美，切合题意
如果说是文学创作之类的，这部分就有好多发挥空间了，因为你可以写的十分的散，比如说写思乡，但是整篇文字都是描写景物和过去家乡的事和人，其中思乡情是从点滴语句中逐渐渗透出来的，需要读者去思考和体会。
如果是高考作文，就没有办法那么随意了，因为阅卷的时候老师不会去细细体会你想说的是什么，所以只能让自己观点明明确确的表现出来，比较常用的方法就是，前启后承，段前先说下，段后在点明……
问题四：云计算以什么为载体 计算的基本特征是开放性，云计算平台应能提供标准的API实现与现有应用兼容。所有的应用移植是渐进过程，云计算基础架构要很好的支撑核心应用，而并不仅仅是新增的需求。
虚拟化技术是这一领域的基础组成部分，它涉及到了服务器、存储、网络、应用和桌面等多个方面，不同类型的虚拟化技术从不同角度解决不同的系统性能问题。
服务器虚拟化对服务器资源进行快速划分和动态部署，从而降低了系统的复杂度，消除了设备无序蔓延，并达到减少运营成本、提高资产利用率的目的。
问题五：航空经济是以什么为标志以什么为载体 以民间客运和货运进入市场为标志。
问题六：光纤通信以什么为载体 提到这个问题 那就要说下光纤通信的定义了
光纤通信：光纤通信是以激波为载体，光缆为传输煤质的一种通信方式。
一定是以光波为载体 光波承载着数字信号在光纤中传播。
相信我这个是正确的 楼上都理解错误
光纤只是传播煤质
植物基因的工程有哪些载体？
中间表达载体是不能将外源基因转化进植物细胞，因此，必须将中间表达载体引入到已改造的受体Ti质粒中，并构建成能侵染植物细胞的基因转化载体，才能在植物基因转化中应用。为利用根癌农杆菌的Ti质粒，发展了一元载体系统和双元载体系统。一元载体系统是指首先将目的基因插入到中间表达载体上，筛选出含有目的基因的重组分子，然后将重组质粒转化到根癌农杆菌中，重组质粒与Ti质粒上的同源序列发生同源重组，将外源基因整合到Ti质粒上，用于侵染植物细胞，T-DNA重组分子就可整合到植物细胞染色体DNA上，再利用植物选择标记基因筛选转化细胞。简单而言，一元载体系统就是指含有目的基因的中间表达载体与改造后的受体Ti质粒通过同源重组所产生的一种复合型载体，通常又称为共整合载体（co-integrated：vector），由于该载体的T-DNA区与Ti质粒Vir区连锁，因而又称为顺式载体（cis-vector）。双元载体（binary：vector）系统是指由两个分别含T-DNA和Vir区的相容性突变Ti质粒构成的系统。其中之一是含有T-DNA转移所必需的Vir区段质粒，它缺失或部分缺失T-DNA序列。它的主要作用是表达毒蛋白，激活T-DNA的转移，故称为辅助Ti质粒（helper：Ti：plasmid）；另一个则是含有T-DNA的质粒。一般作为目的基因的载体，由于其分子量较小，故称为微型质粒（mini-Ti：plasmid），它是一种寄主范围广泛的DNA转移载体质粒，它既含有大肠杆菌复制起始位点，又含有根癌农杆菌复制起始位点，实际上是一种大肠杆菌—农杆菌穿梭质粒。这两种质粒在单独存在的情况下，均不能诱导植物产生冠瘿瘤；若根癌农杆菌细胞内同时存在这两种质粒时，便可获得正常诱导肿瘤的能力，因此，含有双元载体的根癌农杆菌细胞侵染植物时，就可以将含有目的基因的T-DNA整合进植物基因组中。目前以T-DNA转化植物细胞的标准方法大多采用Ti质粒介导的双元载体系统。首先将目的基因插入到微型质粒，含有目的基因的重组微型质粒转化大肠杆菌后，再导入携带辅助Ti质粒的根癌农杆菌中，经筛选后直接感染植物细胞。根癌农杆菌侵染植物细胞后，植物的创伤信号启动Ti质粒上的vir基因，随后将微型质粒上的T-DNA切割下来，转移到植物细胞中。由于双元载体系统的T-DNA和Vir区在两个独立的质粒上，通过反式激活T-DNA转移，故又称为反式载体（trans-vector）。
如何设计构建一个载体，将目的基因在植物根系表达并向
①基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，一个表达载体的组成，除了目的基因外，还有启动子、终止子和标记基因等，①正确；②启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，②正确；③由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，③错误；④终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束，④正确．故选：B．
基因表达载体的构建是什么?
基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。需要通过载体而不能直接将目的基因导入受体细胞的原因是基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子等结构，而目的基因没有。基因表达载体构建的目的为了使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能表达和发挥作用；启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，通过翻译过程，最终获得所需要的蛋白质；终止子使转录在所需要的地方停止下来；标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
在基因表达载体中，标记基因的作用
例如，大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。重组DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。【摘要】
在基因表达载体中，标记基因的作用【提问】
亲您好 作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来【回答】
目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道【回答】
例如，大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。重组DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。【回答】
工业制备HCL的反应原理【提问】
工业制盐酸 2NaCl+2H2O==2NaOH+H2+Cl2（反应条件 通电) H2+Cl2=2HCl（反应条件：点燃） 然后用水吸收 在合成塔内完成【回答】
苯和溴水反应吗【提问】
不反应的，亲。【回答】
